HIPEROXALURIA PRIMARIA. Enfermedad conformacional
[Financiado por el Ministerio de Educacion y Ciencia (SAF2004-03201)]

Resumen:

...La Hiperoxaluria primaria (PH1) es una enfermedad autosomica recesiva habitualmente producida por mutaciones en el gen AGXT. La inmensa mayoria de los pacientes de Canarias con esta enfermedad poseen la misma mutacion:I244T (efecto fundador) y las consecuencias de esta mutacion solo se ponen de manifiesto cuando el paciente es portador tambien del polimorfismo P11L en el mismo gen. Hemos demostrado en cultivos celulares que esta asociacion mutacion-polimorfismo da lugar a una proteina conformacionalmente anomala que sufre agregacion, pero este proceso puede evitarse en parte mediante el uso de chaperonas farmacologicas y pequenas moleculas. Para continuar estas investigaciones in vivo, hemos generado un modelo murino de hiperoxaluria (AgxtKO) asi como ratones transgenicos que expresan el haplotipo AGXT*LTM encontrado en nuestros pacientes. Objetivos: 1. Caracterizacion fisico-quimica de la proteina AGXT*LTM, asi como la variante AGXT*LRM (mutacion mas frecuente a nivel mundial); 2. Mutagenesis dirigida y aleatoria del gen AGXT para definir los residuos mas relevantes en la dimerizacion y agregacion proteica; 3. Generacion de ratones transgenico+KO que expresen los haplotipos AGXT (normal), AGXT*LTM y AGXT*LRM humanos en un fondo deficitario en el gen murino (Agxt-/-). Caracterizacion de los fenotipos (a nivel organico, tisular y celular) para definir: - la complementacion del deficit con el gen humano; - los efectos del haplotipo AGXT*LTM; - los efectos del haplotipo AGXT*LRM; 4. Evaluacion de la quimioprofilaxis con chaperones quimicos (betaina, glicerol), cofactores (piridoxal fostato) y pequenas moleculas (quinacrina) sobre la severidad del fenotipo (a nivel organico, tisular y celular) de ratones transgenicos-KO.